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较早公告: JW-A分液漏斗振荡器简单地说就是一个频率源,一般用在锁相环中。详细说就是一个不需要外信号激励、自身就可以将直流电能转化为交流电能的装置。一般分为正反馈和负阻型两种。所谓/振荡/,其涵义就暗指交流,振荡器包含了一个从不振荡到振荡的过程和功能。能够完成从直流电能到交流电能的转化,这样的装置就可以称为/振荡器/。JW-A分液漏斗振荡器是一种温度可控的恒温水浴槽和振荡器相结合的生化仪器,主要适用于各大中院校、医疗、石油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作生物、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振
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组织捣碎匀浆机关于组织匀浆的制备讲解
点击次数:769 发布时间:2018-11-08
 
   组织捣碎匀浆机关于组织匀浆的制备讲解
  1.取组织块(0.2g-1g)少可到2-5mg,在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,放入5或10ml的小烧杯内
  2.用移液管量取预冷的匀浆介质或者用0.86%冷生理盐水,匀浆介质或生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍,用移液管或移液器取总量的2/3的匀浆介质或生理盐水于烧杯中,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
  3.匀浆的方式有多种:手工匀浆、机器(JJ-2组织捣碎匀浆机)匀浆、超声匀浆、反复冻融。
  手工匀浆:将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6-8分钟),充分研碎,使组织匀浆化。
  机器匀浆:用JJ-2组织捣碎匀浆机研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3-5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
  超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎。
  反复冻融:培养或者分离的细胞可以用以上的方法匀浆,也可以反复冻溶3次左右(即让细胞加适量的低渗液或者双蒸水放低温冰箱中结冰,溶解,再结冰,再溶解,反复3次左右),但有部分酶活力会受影响。
  取少量组织匀浆做涂片(直接涂片、染色均可),显微镜下观察细胞是否磨破,若没有破则可以延长匀浆时间或增加冻融次数。
  4.将制备好的10%匀浆用普通离心机或低温低速离心机3000r/min左右离心10-15分钟,若检测ATP酶,则只需要1000转/分,离心5分钟,将离心好的匀浆留下上清弃下面沉淀。
  根据实验需要,取适量上清液进行各种测定。
 
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